產(chǎn)品介紹

X–Gal是β–半乳糖苷酶（β–galactosidase）的底物，水解后呈藍(lán)色。常用于β-半乳糖苷酶的原位染色檢測(cè)以及藍(lán)白斑篩選。基于這個(gè)特點(diǎn)，pUC系列載體DNA（或其他帶有l(wèi)acZ基因載體DNA）以lacZ 缺失細(xì)胞為宿主進(jìn)行轉(zhuǎn)化時(shí)、或用M13噬菌體載體DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí)，如果在平板培養(yǎng)基中加入X–Gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互補(bǔ)性，可以根據(jù)是否呈現(xiàn)白色菌落（或噬菌斑）而方便地挑選出基因重組體。溶解度: 20 mg/mL DMSO [α]20D : -64 ° (C=1, DMF) 使用方法 ：首先把X-Gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液（-20℃避光保存），然后在100 ml的瓊脂培養(yǎng)基中，加入200 μl的上述溶液、100 μl的IPTG（24 mg/ml）和100 μl的Amp（100 mg/ml），制作成X-Gal、IPTG、Amp平板培養(yǎng)基。當(dāng)DNA片段插入至pUC系列載體（或其他帶有l(wèi)acZ、Amp基因載體），然后轉(zhuǎn)化至lacZ缺失細(xì)胞中后，涂布上述的X–Gal、IPTG、Amp平板培養(yǎng)基，可根據(jù)長(zhǎng)出菌體的藍(lán)白色，而方便地挑選出基因重組體（白色為具有DNA插入片段的基因重組體）。注意事項(xiàng) ： ◆ 培養(yǎng)噬菌體時(shí)，Top agar中的添加量為：50 μl/3 ml（20mg/ml）。 ◆ 含有X-Gal的培養(yǎng)基4℃避光保存，須在1~2周內(nèi)使用。